干货开讲 | 人/小鼠巨噬细胞整体解决方案

巨噬细胞 (Mφ) 为吞噬细胞，源自单核细胞，参与机体的先天性免疫和细胞免疫。是先天性免疫应答的关键效应细胞，他们表面表达多种模式识别受体，条理性受体和细胞因子受体。具有杀伤清除病原体和肿瘤细胞，参与炎症反应，抗原提呈以及免疫调节作用。

巨噬细胞的发育与单核细胞和树突状细胞密切相关，它们是单核吞噬细胞系统的一部分。一般来说，巨噬细胞由骨髓中的单核细胞发育而来，但它们也可以直接从局部前体在外周组织中补充自身。

巨噬细胞存在于大部分组织中，因此具有不同的功能。

主要功能是分为下面几点：

1.免疫监视；2. 细胞因子产生；3. 抗原提呈；4. 肿瘤浸润；5. 伤口愈合和组织重塑；6. 吞噬作用；7. 细胞毒性；

1. 人全血样本

当从人全血中分析或处理巨噬细胞时，常用步骤是分离单核细胞并且将其分化为巨噬细胞。使用Ficoll分离PBMC，然后用CD14磁珠（美天旎，130-050-201）分离单核细胞，然后可使用Human M1 Macrophage Differentiation Kit（R&D, CDK012）或者Human M2 Macrophage Differentiation Kit（R&D, CDK013）诱导其向M1/M2型巨噬细胞分化。

2. 小鼠腹腔巨噬细胞

CD11b Microbeads (130-126-725) + F4/80 Microbeads (130-110-443)

当准备用THP-1细胞诱导巨噬细胞时，可以用 PMA（佛波酯，福麦斯，FMS-FZ207）刺激6小时，诱导细胞分化为M0巨噬细胞。

另外，可以用不同的细胞因子先后刺激M0巨噬细胞来获得M1和M2极化巨噬细胞。可分别通过IFN-γ (Peprotech)和LPS (Sigma)培养48小时以上，使其向M1极化，或者IL-4(Peprotech)和IL-13(Peprotech)培养48小时以上，使其向M2极化。